測定意義:土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。
測定原理:堿性環(huán)境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,通過測定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。
需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、研缽、 蒸餾水、乙醇和甲苯(不允許快遞)。
樣本處理
稱取風(fēng)干混勻土壤約 0.1g,加入 0.05mL 甲苯(自備),輕搖 15min;加 0.4 mL 試劑一并且搖勻后,置于 37℃ 恒溫培養(yǎng)箱,開始計(jì)時(shí),催化反應(yīng) 24h;到時(shí)后迅速加入 1mL 試劑二充分混勻,以終止酶催化的反應(yīng)。10000rpm 室溫離心 10min,取上清液置于冰上待測
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