目前ELISA法仍在研究當(dāng)中占有著主流地位,
魚(yú)ELISA試劑盒的普遍應(yīng)用使得實(shí)驗(yàn)更加方便、經(jīng)濟(jì)和準(zhǔn)確,ELISPOT技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)也決定了它的發(fā)展?jié)摿ΑISPOT法來(lái)源于ELISA,相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破,是定量ELISA技術(shù)的延伸和發(fā)展。由于游離的循環(huán)抗體或CK的半哀期不同,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結(jié)合,傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能確切的反映體內(nèi)的抗體及CK的水平。80年代,國(guó)外的科研工作者根據(jù)ELISA技術(shù)的基本原理,建立了體外檢測(cè)特異性抗體分泌細(xì)胞和CK分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISPOT)。
魚(yú)ELISA試劑盒的操作使用說(shuō)明:
1、標(biāo)準(zhǔn)品
(1)從試劑盒中取出一支標(biāo)準(zhǔn)品,于6000-10000rpm離心30秒。用1ml樣本稀釋液溶解,并用吸頭對(duì)準(zhǔn)凍存管底部反復(fù)吸打5次以助溶解,充分混勻得到標(biāo)準(zhǔn)品S7,放置備用。
(2)取7個(gè)1.5ml離心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl樣本稀釋液。吸取250μl標(biāo)準(zhǔn)品S7到*個(gè)離心管中(S6),輕輕吹打混勻。從S6中吸取250μl到第二個(gè)EP管中(S5),輕輕吹打混勻。以此類(lèi)推進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的倍比稀釋。S0為樣本稀釋液。
2、洗液工作液
濃洗滌液按1:25倍用去離子水進(jìn)行稀釋。例如用量筒量取240ml去離子水,倒入燒杯或其他潔凈容器中,再量取10ml濃洗滌液,均勻加入,攪拌混勻,在臨用前配妥。濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3、標(biāo)記抗體工作液
標(biāo)記抗體液按1:100倍用標(biāo)記抗體稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl標(biāo)記抗體加990μl標(biāo)記抗體稀釋液,輕輕混勻,在臨用*分鐘內(nèi)配妥。
4、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素按1:100倍用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液進(jìn)行稀釋。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液,輕輕混勻
以上就是魚(yú)ELISA試劑盒的操作使用說(shuō)明